贝勒医学院的研究者在研究遗传性障碍-新生儿型早衰症(NPS,Neonatal Progeroid Syndrome)的发生机制过程中,发现了一种新型的葡萄糖调控蛋白激素,将其命名为Asprosin。2016年4月,发表在Cell上的文章上表明,Asprosin抗体可以将小鼠体内的胰岛素水平调节至正常,长期治疗甚至可以恢复小鼠对胰岛素的耐受。Asprosin用于人体的研究可能为糖尿病提供一种新的疗法。
鉴于Asprosin的应用前景,我公司蛋白质部门研究并生产了重组Asprosin。我们将人类FBN1(2732–2871aa)基因构建到PET22b载体上,并在大肠杆菌中表达。该蛋白由140个目的氨基酸和6个His组成,分子量大小为17KD。
图一: Asprosin小量表达图
我们采用最优的表达条件,诱导表达得到重组His-asprosin大肠杆菌菌体。将大肠杆菌破碎分离,与Ni-NTA亲和柱结合,采用镍柱亲和层析的方法纯化His-asprosin蛋白。分别用20mM、50mM、100mM、200mM、300mM、400mM、500mM咪唑(PH=8.0)洗脱,洗脱样品用SDS-PAGE电泳检测,实验结果显示50mM的咪唑就可以将目的蛋白洗脱下来。
图二: Asprosin蛋白纯化图
纯化后的Asprosin蛋白经过进一步的分子筛和去内毒素等处理,并确定纯度(>98%)和浓度(1mg/ml)后,保存于PBS-glycerol
buffer,可用于公司ELISA Kit及WB等其他检测。
本公司自主研发了Asprosin ELISA Kit 及FBN1 ELISA Kit,欢迎大家选购。