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免疫微球分析法

免疫微球是由带官能团的粒状载体与具有亲和力的配体相互结合而构成的。免疫微球测定是利用免疫微球作材料进行有效分离和分析某些生化物质过程的总称。根据载体性质的不同又可分为乳胶免疫微球、细胞免疫微球、磁珠免疫微球等。

1)乳胶免疫微球    将苯乙烯或甲基丙烯酸等单体溶液在引发剂的作用下聚合生成聚苯乙烯等物质,进而制成直径0.01~1.0μm的微球乳胶液。聚合过程中如果添加了适量染料或荧光试剂等物质就能得到有色或发光的乳胶载体;用这些载体与相应的抗原或抗体物质进行共价偶联结合,就可制成相应的乳胶免疫微球产品。

2)红细胞免疫微球红细胞的 直径约为7μm,为暗红色球状体,是一种良好的载体,在交联剂的作用下红细胞表面的蛋白质可与抗原或抗体相连接,这一过程为红细胞致敏。用抗体或抗原致敏的红细胞与相应的抗原或抗体发生免疫反应,即可产生肉眼可见的被动凝集现象。红细胞被动凝集反应可分为3种类型: ①间接血凝反应,即用特异抗原致敏红细胞检测特异抗体;②反向间接血凝反应,即用特定抗体致敏红细胞检测相应抗原;③血凝抑制反应,即用定量的已知抗原与血清样品作用后,检测其抑制红细胞凝集的程度。

3)磁珠免疫微球    将高分子化合物如聚苯乙烯、纤维素、琼脂糖等包被磁性氧化铁(Fe0/Fe2O)构成直径13μm的微磁珠,经顺磁化处理后于溶液中与抗原或抗体等以物理吸附或化学交联作用相交联而制成磁珠免疫微球。它能与样品中对应的抗体或抗原反应后在外加磁场的作用下进行分离,进而分离出所要检测的样品。用磁珠免疫微球分离时速度快、纯度高,可用于放射免疫和酶联免疫检测等方面。