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多组分免疫分析

多组分免疫分析法( Multianalyte immunoasy, MIA) 是一种用同份样品同时测定两种或两种以上物质的免疫分析方法,它是新近发展起来的并且引起人们兴趣和关注的分析新技术,由于抗体的特异性,一种抗体一般只能检测一种抗原,当进行多组分分析时,就得同时使用多种抗体,多组分免疫分析技术现在有两种设计方式。

1)多探针标记法  它基于用不同标记物对多种抗原或半抗原标记,用竞争法测定各物质的量,对探针的要求是有相容的分析条件和显著的信号差别,以使其互不干扰。由于进行同时检测,几种标记物的测定条件必须相互妥协,故测定灵敏度和组分数均受到限制。适合于同时检测的标记物体系甚少,通常实施的是双探针标记分析,Gosling等以125I 131I标记,采用闪烁计数检测,同时测定了三碘甲状腺素和甲状腺素;王敏灿等人用Eu3+Sm3+的二乙三氨五乙酸的配合物标记小分子药物—苯巴比妥和苯妥英钠,用二抗包被,通过竞争法对苯妥英钠和苯巴比妥进行同时测定,其灵敏度分别可达50ng/mL20ng/mL。由于在治疗中经常要求测定血药浓度,以据此改变服药剂量和修改给药方案,又由于有一半以上癫痫患者同时服用多种抗癫痫药物,因此,该法的建立有一定的临床意义。

2)多组分定位包被空间分辨分析法  即是利用空间的不同位置标记同种标记物来测定,在不同的固相体系或同一固相载体上的不同反应区带上包被不同抗体,用于固相免疫同时测定。该法虽用一个标记物,但需要一个能分步或同时检测各个反应区带的检测系统,通过扫描测定可完成理论上任意组分的同时分析。因此,该法在定位包被和检测技术上有一定的难度。目前,该法已取得了相当成功的应用成果。Kakabakos等用该法包被抗体和用夹心法激光Eu3+时间分辨荧光免疫分析法同时测定了血清中的促黄体素、促滤细胞素、人绒毛促性腺激素和催乳素,该法在药物滥用检测中得到了应用,可同时测定可卡因、吗啡、苯巴比妥安非他命等7种药物。