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凝集反应

在合适的电解质存在下, 细菌和红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后,产生肉眼可见的特异性凝集现象称为凝集反应。凝集反应的发生可分为二个阶段:抗原抗体的特异结合,出现可见的颗粒凝集。根据反应中抗原的性质和反应方式又可分为直接凝集反应、间接凝集反应和共同凝集反应或协同凝集反应。凝集试验的灵敏度高、方法简便,已广泛应用于临床血清学诊断、生化物质和病毒抗体的检测。

1)直接凝集反应  直接凝集反应是指细菌、螺旋体和红细胞等颗粒抗原在适当的电解质中与相应的抗体结合后产生凝集现象的过程,根据在反应中使用的载体材料的差异,又可分为玻片法、试管法和微量血凝板法。直接凝集反应可用于抗原或抗体含量的定性与定量检测,玻片凝集试验为定性试验方法,一般采用已知抗体作为诊断血清,与受检颗粒抗原如菌液或红细胞悬液各加一滴在玻片上,混匀,数分钟后即可用肉眼观察凝集结果,出现颗粒凝集的阳性反应。此法简使、快速,适用于从病人标本中分离得到的菌种的诊断或分型。试管凝集试验为半定量实验方法,在微生物学检验中常用已知细菌作为抗原液与一系列稀释的受检血清进行混合后观察试管中出现的凝集程度,通常以产生明显凝集现象的最高稀释度作为血清中机体的效价。

2)间接凝集反应   间接凝集反应是指吸附于适当大小的颗粒性载体表面的可溶性抗原(或抗体)与相应的机体(或抗原)作用后,在适宜的电解质存在的条件下产生特异性凝集的现象,也叫被动凝集反应。它适用于各种抗体和可溶性抗原的检测,被广泛应用于临床检测,根据致敏载体作用的是抗原或抗体以及凝集反应的方式,间接凝集反应又可分为以下几类:①正向间接凝集反应,其程序是以抗原致敏载体以检测标本中相应抗体;②反向间接凝集反应、以特异性抗体致敏载体以检测标本中相应的抗原;③间接凝集抑制反应,采用抗原致敏的颗粒载体以及相应的抗体来检测标本中是否存在与致敏抗原相同的抗原。其具体方法是先将标本与抗体试剂作用,然后加入致敏的载体,若出现凝集现象,说明标本中不存在相同抗原,抗体试剂未被结合,因此仍与载体上的杭原起作用,如标本中存在相同抗原,则凝集反应被抑制。在实验中,可用的载体有动物或人的红细胞、细菌、惰性颗粒如皂土、明胶、聚苯乙烯胶乳、活性炭等。