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ELISA血液样本的处理方法

样本的处理对于ELISA实验十分重要。ELISA检测的样本类型包括血液(血清、血浆),组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清及一些皮肤组织、尿液、粪便、肺泡灌洗液、唾液、脑脊液、胸腹水、前列腺液、精液、阴道分泌物等。样本收集的时间、处理方法和保存都会影响ELISA实验结果。以下是ELISA血液样本处理方法的建议。

血液采取后应尽快进行处理,使血清(浆)从与血细胞接触的全血中分离出来。其中血清与血浆的区别是血清是血液凝固后缺少纤维蛋白原的血浆,故血浆中除额外含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均等同于血清。

对于选择测血清还是血浆样本,主要根据为由于血清中缺乏很多的凝血因子,但有一些凝血产物,如果是测凝血因子建议选择血浆样本;同时血浆中有纤维蛋白原,如果纤维蛋白原对待检测指标有影响,建议选择血清样本。大多数情况下二者均可以选择。

处理方法:

血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2 小时或 4 度过夜,然后 1000×g 离心 20分钟,取上清即可检测。标本放于-20度或-80保存,避免反复冻融。

血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30 分钟内于2 ~8 1000 g 离心15 分钟,取上清即可检测。标本放于-20度或-80保存,避免反复冻融。一般建议用 2.0% EDTA1%肝素,3.8%枸橼酸钠作为抗凝剂采集标本

处理样本的过程就是收集目标蛋白的过程,由于蛋白容易变性,降解,故该过程应尽量温和。样本处理之后的储存也非常重要,尤其注意不要反复冻融,样本处理之后可分装密封保存, 4 度保存应小于 1 周,-20 度不应超过 1 个月,-80度不应超过2个月。在标本使用前应缓慢均衡至室温,不应加热使之融解。样本的处理是实验成功的第一步, 以上关于血液样本的处理方法供研究者参考。